核酸檢測

核酸檢測

檢測病毒的醫療技術
核酸檢測将艾滋病病毒的檢測窗口期縮短至11天,并且核酸檢測這項技術目前可将乙肝、丙肝病毒的檢測“窗口期”分别由原來的50天、72天縮短到25天、59天。HIV的主要基因結構和組合形式與其他反轉錄病毒相同,均由5′末端長重複(longterminalrepeat,LTR)、結構蛋白編碼區(gag)、蛋白酶編碼區(pro)、具有多種酶活性的蛋白編碼區(pol)、外膜蛋白(env)和3′末端的長重複LTR區組成。艾滋病病毒是逆轉錄病毒,所謂逆轉錄病毒是它在侵入宿主細胞後,以自己的單鍊RNA為模闆,按照堿基互補配對原則,在逆轉錄酶的作用下,合成cDNA,新合成的cDNA插入宿主的核DNA中,随宿主DNA複制、轉錄、翻譯達到擴增目的病毒。
  • 中文名:核酸檢測
  • 外文名:
  • 所屬分類:
  • 目标:RNA或DNA結構
  • 方法:PCR擴增方法
  • 領域:醫學

艾滋病核酸檢測

艾滋病核酸檢測,直擊艾滋病病毒的RNA或DNA結構,檢測血液中是否存在病毒核酸,診斷有無病原體感染。采用PCR技術,使用分子生物學實驗室通用的擴增試劑和自行研究開發設計的複合引物,複蓋常見的HIV毒株,具有很高的靈敏度。使用二次擴增的套式PCR擴增方法,提高檢測的特異性,降低假陽性的概率。

核酸檢測将艾滋病病毒的檢測窗口期縮短至11天,并且核酸檢測這項技術目前可将乙肝、丙肝病毒的檢測“窗口期”分别由原來的50天、72天縮短到25天、59天。

艾滋病核酸檢測技術

HIV基因結構

HIV基因組由兩條單鍊RNA組成,每個RNA基因組約為9.7k,在RNA5′端有一帽結構(m7G5ppp5′GmpNp),3′端有poly(A)尾巴。HIV的主要基因結構和組合形式與其他反轉錄病毒相同,均由5′末端長重複(longterminalrepeat,LTR)、結構蛋白編碼區(gag)、蛋白酶編碼區(pro)、具有多種酶活性的蛋白編碼區(pol)、外膜蛋白(env)和3′末端的長重複LTR區組成。

核酸提取均采用磁珠法。

1)磁珠提取的原理:

将磁珠上标記特異性吸附核酸的物質特異性吸附核酸,并通過磁分離技術将病毒核酸從裂解液中提取出來。

2)步驟:

裂解—吸附—洗滌—洗滌—洗滌—洗脫

3)優點:

a.磁珠提取特異性高,受标本因素影響小,靈敏度高

b.易于實現自動化

4)缺點:

a.成本較高、并需要一定的儀器(半自動、全自動)。

b.完全手工工作,工作量太大。

應用套式聚合酶鍊反應(nPCR)檢測技術

根據HIV-1gag.pol和env基因序列設計了套式聚合酶鍊反應(nesledpolymerasechainreaction,nPCR)引物。将外周血單個核細胞裂解液先用外側引物擴增,其産物再經内側引物擴增,直接走凝膠電泳判定結果。nPCR的敏感性。較常規PCR高100~1000倍,可檢測到0.5fg質粒DNA和50μ1HIV-1感染者外周血樣中的HIV基因。

根據專業文獻記載,用本法檢測63名HIV-1感染者全為陽性,而61名健康人和可疑者均為陰性,後者經追蹤檢測抗體排除了HIV-1感染。

由此可知,nPCR是一種敏感性極高、特異性很強、操作簡便易行的HIV-1基因檢測技術。它已經在早期診斷和外周血病毒含量檢測中發揮了重要作用,而且有着更廣闊的應用前景。

艾滋病核酸檢測的優點

人體感染艾滋病病毒後,一般需要2-12周,平均42天左右血液中才可檢測到HIV抗體。在這段時期内,常規檢測技術根本無法檢測出HIV病毒,這就是常說的“HIV窗口期”。“窗口期”的存在,也解釋了為什麼一些病人在接受了正規醫院輸血後卻感染艾滋病的原因。

在感染過程中,首先出現的是病毒RNA,這時可以用PCR的方法檢測出來,之後出現的是IgM抗體,使用雙抗原夾心法即可以檢測出來,然後出現的是IgG抗體,使用間接法可以檢測出來。

現在省市疾病控制中心和檢測試紙,使用的檢測方法都是檢測抗體抗原,無法避免“HIV窗口期”因素的幹擾。所以說,常規檢測技術在HIV窗口期内存在重大缺陷。

艾滋病核酸檢測的意義

有些人認為艾滋病既然無法治愈,查出來也沒用,不願進行核酸檢測。實際上,早期診斷、早期治療不僅有利于延緩病情發展,提高生活質量,還可及時保護他人免受感染,有利于艾滋病的控制。

1、解決艾滋病病毒感染的“窗口期”問題

原來的HIV免疫學檢測方法都存在一定的窗口期。艾滋病病毒在進入人體後,機體需要經過一段時間才會産生抗體,在此期間血液抗體檢測呈陰性,抗原抗體通常是在感染後3—6周後才能被檢測出來,時間上較久,而且在準确度上會大打折扣。在窗口期雖測不到HIV抗體,但體内已有HIV,因此窗口期同樣具有傳染性。

在血液篩查方面,艾滋病病毒核酸檢測無疑可以增加血液的安全性。國家相關法律規定,由窗口期血源引起的感染不屬于醫療事故。原來的免疫學檢測方法都存在一定的窗口期,這樣給血液安全帶來很大的威脅。在目前EIA試劑檢測後,美國幾種主要經血傳播病毒的“窗口期”分别為:HIV22天,HTLV51天,HCV72天,HBV63天;輸血後病毒危險性分别為1:493000,1:641000,1:103000和1:63000。在美國,艾滋病病毒核酸檢測已經常規用于HIV和HCV篩查。這樣做大大降低了輸血後感染HIV病毒的殘餘危險性。

2、及早發現,早期藥物預防,降低感染幾率

進行HIV病毒核酸檢測,能及早發現感染,在HIV病毒入侵兩周内,及時注射丙種球蛋白抑制HIV,可以降低被感染的幾率。

艾滋病病毒是逆轉錄病毒,所謂逆轉錄病毒是它在侵入宿主細胞後,以自己的單鍊RNA為模闆,按照堿基互補配對原則,在逆轉錄酶的作用下,合成cDNA,新合成的cDNA插入宿主的核DNA中,随宿主DNA複制、轉錄、翻譯達到擴增目的病毒。丙種球蛋白是逆轉錄抑制劑,就是阻止HIV逆轉錄宿主DNA過程的藥物。及時發現,盡早治療,能降低被感染的幾率,也能增強機體對HIV的特異性細胞和體液免疫應答,縮短潛伏感染的半衰期,維持CD4+細胞的功能,減緩艾滋病的病程進展。

美國《時代》雜志網站近日發布了“2011年十大醫學突破”評選結果。其中有一項即為“艾滋病防治的新進展”。新研究發現,抗逆轉錄病毒(ARV)藥物不僅幫助艾滋病患者抗擊HIV,還能讓健康人遠離艾滋病毒。美國華盛頓大學一項涉及4758名參試者的研究發現,服用該藥的健康者HIV感染率降低73%。

3、快速排查感染隐患,解除恐艾心理壓力

近年來,随着艾滋病的迅猛發展,有許許多多的人患上了這種艾滋病恐懼症。恐懼,是人類的一種本能的反應,适度的恐懼對人類的生存是有利的,但不必要的、過分的恐懼卻是有害的,是一種心理異常。

艾滋病恐懼症就是這樣一種心理異常,它包括以下情形:不必要地過分擔心自己會得艾滋病,或者毫無根據地懷疑自己感染了艾滋病,患者同時伴有一些情緒異常和行為異常,嚴重影響其學習、工作、生活及社會交往。

進行核酸檢測,用最先進的技術,擺脫艾滋陰霾。上海維斯塔生物科技有限公司的HIV病毒核酸檢測系統,由國家級的HIV專業研究和檢測人員開發,用最快速和準确的方法排查感染隐患,并有國家CDC的質控把關,将保證檢驗結果的準确性。相信科學檢測,如果檢測為陰性即可完全排除感染的可能,不要再無謂地擔心和猜疑,解除恐艾心理壓力,還您健康生活。

檢測費用

2021年2月1日,央視網報,2020年底前,廣東、湖南等全國半數以上省份已将公立醫院核酸檢測收費調整為每人次最高限價80元;2021年伊始,又有北京、天津等多地公立機構将核酸檢測費用下調,北京、陝西等地還将其費用納入了醫保。預計在春節前,全國公立醫院新冠病毒核酸檢測單人份價格将全部降到80元以内。n在核酸檢測一頭連着“防疫”一頭牽着“民生”的當下,此舉有望起到一“箭”三“雕”之效。n首先,這可以降低人們的核酸檢測成本,減輕個人負擔。n其次,這可以調動人們配合防疫的積極性,為春節疫情防控創造更好的機會窗口。n再者,這可以推動集中帶量采購模式加速落地。n本質上,核酸檢測費用調整背後,是一舉多得的“加減法”:核酸檢測費用做了“減法”,民生獲得感、防疫積極性、産業發展空間卻做了“加法”。這對公共決策也不無啟示:公共決策,就該有多維度的考量,最終用“公共利益算法”求得最優解,實現共益共赢。

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