基本介紹
免疫印迹是一個用于蛋白質分析的常規技術,在電場的作用下将電泳分離的蛋白從凝膠轉移至一種固相支持物,然後利用抗原-抗體的特異性反應,從蛋白混合物中檢測出目标蛋白,從而定量或定性的确定正常或實驗條件下細胞或組織中目标蛋白的表達情況。可以同時比較多個樣品同種蛋白的表達量差異。
基本原理
将混合抗原樣品在凝膠闆上進行單向或雙向電泳分離,然後取固定化基質膜與凝膠相貼。在印迹紙的自然吸附力、電場力或其它外力作用下,使凝膠中的單一抗原組份轉移到印迹紙上,并且固相化。最後應用免疫複蓋液技術如免疫同位素探針或免疫酶探針等,對抗原固定化基質膜進行檢測和分析。
優點
免疫印迹法是一項分析抗原、抗體的技術。它具有下列優點:
1、濕的固定化基質膜柔韌,易于操作;
2、固定化的生物大分子可均一的與各種免疫探針接近,不會象凝膠那樣受孔徑阻隔;
3、免疫印迹分析隻需少量試劑;
4、孵育、洗滌的時間明顯減短;
5、可同時制作多個拷貝,用于多種分析和鑒定;
6、結果以圖譜形式可長期保存;
7、免疫探針可通過降低PH值等方法,象抹去錄音磁帶一樣将探針抹掉,再換用第二探針進行分析檢測。免疫印迹法的應用範圍及優點不僅局限于此,它必将随着這一方法的深入研究而不斷發展和完善。