解釋
雙縮脲試劑是由雙縮脲試劑A和雙縮脲試劑B兩種試劑組成.
雙縮脲試劑A的成分是氫氧化鈉的質量分數為0.1g/mL的水溶液；
雙縮脲試劑B的成分是硫酸銅的質量分數為0.01g/mL的水溶液。
雙縮脲試劑可以驗證蛋白質的存在。
具體方法是
先将雙縮脲試劑A加入組織樣液，搖蕩均勻，在加入雙縮脲試劑B，搖蕩均勻。如果組織裡含有蛋白質，那麼會看到溶液變成紫色。
原理
雙縮脲法測定蛋白質含量實驗中，雙縮脲是在大約180°C條件下加熱兩個尿素分子，以達到釋放出一個氨分子而獲得的産物。在強堿性溶液中，縮二脲和硫酸銅形成紫色絡合物，稱為縮二脲反應。任何包含兩個酰胺基或兩個直接連接的肽鍵或可以通過中間碳原子連接的肽鍵的化合物都将發生縮二脲反應。
紫色複合色的強度與蛋白質濃度成正比，與蛋白質分子量和氨基酸組成無關。它可以用來确定蛋白質含量。測量範圍是1-10mg蛋白質。
幹擾測定的主要物質是：硫酸铵，Tris緩沖液和某些氨基酸。這種方法的優點是速度快，不同的蛋白質産生相似的顔色，幹擾物質少。主要缺點是靈敏度差。因此，縮二脲法通常不用于蛋白質的精确測定。
應用
雙縮脲（NH3CONHCONH3）是兩 個分子脲經180℃左右加熱，放出一個分子氨後得到的産物。在強堿性溶液中，雙縮脲與CuSO4形成紫色絡合物，稱為雙縮脲反應。凡具有兩個酰胺基或兩個直接連接的肽鍵，或能過一個中間碳原子相連的肽鍵，這類化合物都有雙縮脲反應。
H2O
O=C C=O
HN NH
R-CH CH-R
O=C Cu C=O
HN NH
R-CH CH-R
H2O
試劑作用
雙縮脲試劑可以驗證蛋白質的存在。
具體方法是：
先将雙縮脲試劑A加入組織樣液，振蕩均勻（必須營造堿性環境），再加入雙縮脲試劑B，振蕩均勻。如果組織裡含有蛋白質，那麼會看到溶液變成紫色。具有兩個或兩個以上肽鍵的化合物皆可與雙縮脲試劑産生紫色反應。蛋白質的肽鍵在堿性溶液中能與Cu2+絡合成紫紅色的絡合物。顔色深淺與蛋白質濃度成正比。
雙縮脲（NH2CONHCONH2）是兩個分子脲經180℃左右加熱，放出一個分子氨後得到的産物。
雙縮脲試劑本是用來檢測雙縮脲，因蛋白質中也有-CONH-基也可用于檢驗蛋白質，與蛋白質接觸後的顔色呈紫色。
注意事項
在使用雙縮脲試劑時候，必須注意，必須是先加0.1 g/mL氫氧化鈉溶液，再加0.01 g/mL硫酸銅的水溶液。(若先加入硫酸銅[CuSO4]溶液，再加入氫氧化鈉[NaOH]溶液，則無法充分制造堿性環境，此時CuSO4會與NaOH發生複分解反應，生成藍色氫氧化銅[Cu(OH)2]沉澱，導緻現象不清，無法較好地達到實驗目的.
與雙縮脲區别
雙縮脲（NH2CONHCONH2）是兩個分子脲經180℃左右加熱，放出一個分子氨後得到的産物。
雙縮脲試劑是由雙縮脲試劑A和雙縮脲試劑B兩種試劑組成。
雙縮脲試劑A的成分是氫氧化鈉的質量分數為0.1g/mL的水溶液；
雙縮脲試劑B的成分是硫酸銅的質量分數為0.01g/mL的水溶液。
雙縮脲試劑可以驗證蛋白質的存在，遇蛋白質産生紫色。
簡單的說，雙縮脲是一種化學物質，而檢測蛋白質用的那兩個試劑之所以叫雙縮脲試劑，是因為檢測原理和雙縮脲的形成相似。
方法學評價
優點：雙縮脲法測定蛋白質的測定範圍是1~10mg蛋白質，操作簡單、快捷。既适合手工操作，又适合自動化分析，重複性好、線性關系好， 雙縮脲試劑可以長期保存（ 若貯存瓶中有黑色沉澱出現，則需要重新配制）。
缺點：靈敏度差，測定範圍窄，樣品需要量大，不同的蛋白質産生顔色的深淺相近，因此它常用于需要快速，但并不需要十分精确的蛋白質測定。幹擾測定的物質包括有：在性質上是氨基酸或肽的緩沖液，如TrIs緩沖液，因為它們産生陽性呈色反應，銅離子也容易被還原，有時出現紅色沉澱。
