基本介紹
膠原酶按其存在的方式不同可分為人體内源性膠原酶和藥用膠原酶兩種。人體内源性膠原酶是指人體内部本身所具有的膠原酶，如牙龈、觸膜等上皮組織和關節滑膜、椎間盤内都不同程度的存在着這種膠原酶，它在體内膠原蛋白的分解過程中發揮着不可或缺的作用。
1、膠原酶Ⅰ用于上皮、肺，脂肪和腎上腺組織細胞的分離。用于消化組織中連接部分使其成為單個細 胞，用于哺乳動細胞的分離。
2、膠原酶Ⅳ包含至少7種蛋白酶成分，分子量從68-130KD不等。它能消化多種組織。
3、膠原酶Ⅴ包含至少7種蛋白酶成分，分子量從68-130KD不等。它可用于胰腺小島組織的分離，将結締組織分離成單個細胞。
4、膠原酶Ⅱ适用于肝髒，骨，甲狀腺，心髒和唾液腺組織。
膠原酶的配置
膠原酶溶液同胰蛋白酶一樣配制、消毒滅菌和儲藏。
注意：
因為Ⅰ型膠原酶分子顆粒比胰酶大，不容易過濾，因此可以用蔡式濾器過濾除菌。
鈣、鎂離子和血清成分不會影響膠原酶的消化作用，因而可用BSS（如D-hanks或者PBS）或含血清的培養液配制。
使用方法
1.将漂洗、修剪幹淨的組織剪成1~2mm3左右小塊
2.将組織塊放入離心管（三角燒瓶）中加入30~50倍體積的膠原酶溶液，旋緊蓋子（密封燒瓶）。
3.将燒瓶放入37℃水浴或者37℃孵箱内，每隔3min振搖一次，如能放在37℃的恒溫震蕩水浴箱中則更好。
消化時間與組織的類别很有關系，對于某些腫瘤組織或其他較緻密結締組織，消化時間4~48h，對于容易消化的組織可以采用37℃震蕩消化15~45min，也可以根據具體情況而定。如組織塊已分散而失去塊的形狀，一經搖動即成細胞團或單個細胞，可以認為已消化充分。上皮組織經膠原酶消化後，由于上皮細胞對此酶有耐受性，可能仍有一些細胞團未完全分散，但成團的上皮細胞比分散的單個上皮細胞更易生長，因此，如無特殊需要可以不必再進一步處理。
4.收集消化液（有時含個别組織塊及沒有充分消化的組織碎屑則需用100目不鏽鋼網過濾），離心1000r/min，5min，去除上清，用Hanks液或者無血清培養液離心漂洗1~2次，去除上清，加培養液制成細胞懸液，接種培養瓶。
