介紹
v=Vmax×[S]/（Km+[S])，這個方程稱為Michaelis-Menten方程，是在假定存在一個穩态反應條件下推導出來的，其中Km值稱為米氏常數，Vmax是酶被底物飽和時的反應速度，[S]為底物濃度。由此可見Km值的物理意義為反應速度（v）達到1/2Vmax時的底物濃度（即Km=[S]），單位一般為mol/L，隻由酶的性質決定，而與酶的濃度無關。可用Km的值鑒别不同的酶。當底物濃度非常大時，反應速度接近于一個恒定值。
在曲線的這個區域，酶幾乎被底物飽和，反應相對于底物S是個零級反應。就是說再增加底物對反應速度沒有什麼影響。反應速度逐漸趨近的恒定值稱為最大反應速度Vmax。對于給定酶量的Vmax可以定義為處于飽和底物濃度的起始反應速度n。對于反應曲線的這個假一級反應區的速度方程可寫成一種等價形式：n（飽和時）=Vmax=k[E][S]0=k[E]total=kcat[ES]。速度常數k等于催化常數kcat，kcat是ES轉化為遊離的E和産物的速度常數。飽和時，所有的E都是以ES存在。方程（3.2）中還有另一個簡單的關系式：Vmax=kcat[E]total。從中得出：kcat=Vmax/[E]total。kcat的單位是s－1。催化常數可以衡量一個酶促反應的快慢。n米氏常數Km是酶促反應速度n為最大酶促反應速度值一半時的底物濃度。這可通過用[S]取代米氏方程中的Km證明，通過計算可得n=Vmax/2。
米氏方程更适合反硝化動力學拟合,最佳的米氏常數(Km)為35mg/kg;米氏最大速率常數(vmax)與一級動力學速率常數(K)具有顯著的相關性(r=0.96,P0.05)。
模型改進
1925年BriggsG.E.和HaldaneJ.B.S.對該模型提出了修正，但仍保留米-曼氏假設的後三點。他們用穩态模型（steady-statemodel）或稱Briggs-Haldane氏模型：代替了平衡态模型。對觀測初速率（即産物P尚未生成或很少生成時）來說，式中仍可忽略不計。所謂穩态是指反應進行不成的一段時間内（順便提及，幾毫秒内，這段時間的狀态稱為前穩态），系統中[ES]由零增加到一定值，在一定時間内雖然[S]和[P]在不斷變化，ES複合體也在不斷地生成和分解，但ES的生成速率與分解速率接近相等，[ES]基本保持不變。
參數意義
①當ν=Vmax/2時，Km=[S]。因此，Km等于酶促反應速度達最大值一半時的底物濃度。n②當k-1>>k+2時，Km=k-1/k+1=Ks。因此，Km可以反映酶與底物親和力的大小，即Km值越小，則酶與底物的親和力越大；反之，則越小。n③Km可用于判斷反應級數：當[S]<0.01Km時，ν=（Vmax/Km）[S]，反應為一級反應，即反應速度與底物濃度成正比；當[S]>100Km時，ν=Vmax，反應為零級反應，即反應速度與底物濃度無關；當0.01Km<[S]<100Km時，反應處于零級反應和一級反應之間，為混合級反應。n④Km是酶的特征性常數：在一定條件下，某種酶的Km值是恒定的，因而可以通過測定不同酶（特别是一組同工酶）的Km值，來判斷是否為不同的酶。n⑤Km可用來判斷酶的最适底物：當酶有幾種不同的底物存在時，Km值最小者，為該酶的最适底物。n⑥Km可用來确定酶活性測定時所需的底物濃度：當[S]=10Km時，ν=91%Vmax，為最合适的測定酶活性所需的底物濃度。n⑦Vmax可用于酶的轉換數的計算：當酶的總濃度和最大速度已知時，可計算出酶的轉換數，即單位時間内每個酶分子催化底物轉變為産物的分子數。n⑷Km和Vmax的測定：主要采用Lineweaver-Burk雙倒數作圖法和Hanes作圖法。
雙倒數圖
常用的米氏方程轉換形式是Lineweaver-Burk方程，也稱為雙倒數方程。
使1/v對1/[S]作圖，可以獲得一條直線。從直線與x軸的截距可以得到1/Km的絕對值；而1/Vmax是直線與y軸的截距。雙倒數作圖直觀、容易理解，為酶抑制研究提供了易于識别的圖形。
缺點：底物濃度低時，坐标點集中于坐标左下方，使得誤差增大，往往偏離直線，Vm、Km無法精确定出。
解決方法：底物濃度配成1/[S]的濃度級差，而不是[S]的濃度極差，使點距離平均，再以最小二乘法線性回歸分析。
