簡介
肉膏蛋白胨培養基是一種廣泛用于培養細菌的培養基。而LB培養基則是一種近年來用于培養基因工程受體菌(大腸杆菌)的常用培養基。兩者都屬于半合成培養基。肉膏蛋白胨的培養基主要成分是牛肉膏、蛋白胨和NaCl。而LB培養基的主要成分是胰蛋胨、酵母提取物和NaCl。高氏合成一号培養基是一種用于培養放線菌的合成培養基。培養基中的可溶性澱粉作為碳源和能源 。
分類
液态培養基n根據《分子克隆實驗指南》(J.薩姆布魯克D.W.拉塞爾著)配制每升培養基,應該在950 ml去離子水中加入:n胰蛋白胨10gn酵母提取物5gnNaCl 10gn搖動容器直至溶質溶解.用5mol/LNaOH調pH至7.0.用去離子水定容至1L.在15psi高壓下蒸汽滅菌21min.n培養的菌種一般是經過改造的無法在外界環境單獨存活和擴增的工程菌.通過培養工程菌,我們可以表達大量的外源蛋白,也可以拿到帶有外源基因的質粒,工程菌的有效擴增是生化分子實驗的基礎.
nLB培養基的配方如下:n胰蛋白胨(Tryptone) 10g/Ln酵母提取物(Yeast extract) 5g/Ln氯化鈉(NaCl) 10g/Ln另外根據經驗值用NaOH調節該培養基的pH,使其達到7.4(該pH适合使用最廣的原核表達菌種E.coli的生長)n固态培養基n固态LB培養基n固态LB培養基nLB固體培養基1L和液體一樣,加15g~20g瓊脂粉,一定要在溫度降下之前加好抗生素,并且倒好闆。
倒闆
1.配制:100mlLB培養基加入1~1.5g瓊脂粉。n2.抗生素的加入:高壓滅菌後,将融化的LB固體培養基置于55℃的水浴中,待培養基溫度降到55℃時(手可觸摸)加入抗生素,以免溫度過高導緻抗生素失效,并充分搖勻。n3.倒闆:一般15ml-20ml倒1個闆子。培養基倒入培養皿後,打開蓋子,在紫外下照10-15分鐘。n4.保存:用封口膠封邊,并倒置放于4℃保存,一個月内使用。ph值需要控制在7.4。