酵母細胞壁

酵母細胞壁

綠色添加劑
酵母細胞壁是一種綠色添加劑,富含β-葡聚糖和甘露聚糖(MOS)等多種生物活性物質。通過對酵母胞壁不溶性β-D-葡聚糖的幾種定量測定方法的比較分析,表明經酸水解法處理後得到的測定結果偏高,經酸-酶水解法處理後的測定結果更準确;對水解後産生的葡萄糖采用生物傳感儀法定量,結果穩定,操作時間短,更适合在生産過程和質量控制中使用;待測樣品中的α-葡聚糖對測定結果有明顯的幹擾,β-D-葡聚糖含量應為總葡聚糖含量與α-葡聚糖含量之差。[1]
  • 中文名:酵母細胞壁
  • 外文名:yeast cell wall
  • 别名:
  • 厚 度:0.1~0.3μm
  • 重 量:占細胞幹重的20%~30%
  • 組 成:D-葡聚糖和D-甘露聚糖等
  • 用 處:綠色添加劑

介紹

酵母細胞壁是一種綠色添加劑,富含β-葡聚糖和甘露聚糖(MOS)等多種生物活性物質,具有增強免疫、防治疾病、促進生長、緩解應激、吸附黴菌毒素、補充營養等多種生理功能,且其來源廣泛,生産成本低廉,現已應用到豬、禽、反刍家畜、水産等動物養殖。

近年來,随着養殖業向集約化、規模化、高密度轉型,飼養畜禽容易遭受多種應激影響,主要表現為免疫力降低、易發病、死亡率高,畜産品質量受影響,可明顯降低養殖效益。通過飼料添加劑手段解決以上問題,成為一種常規途徑。研究表明,酵母細胞壁是一種新型的綠色飼料添加劑,其主要成分對多種動物具有促進生長、增強免疫、防治疾病、緩解應激、吸附黴菌毒素、補充營養等多種生理功能,已在豬、雞、牛、羊、水産動物中得到廣泛應用,且取得了良好效果。

結構組成

酵母細胞壁約占整個細胞幹重的20%~30%,具有維持細胞形态和細胞間識别的重要作用。按結構劃分,酵母細胞壁可分為3層,内層為葡聚糖層,中間層主要由蛋白質組成,外層為甘露聚糖層,層與層之間可部分鑲嵌;按化學組成劃分,甘露聚糖約占酵母細胞壁幹重的30%,β-葡聚糖約占30%,糖蛋白和幾丁質約占20%,蛋白質、類脂、無機鹽等其他成分約占20%。最内層的β-葡聚糖屬結構多糖,與原生質體膜相連接,構成了酵母細胞壁的主要成分,功能是支撐外部甘露聚糖。β-葡聚糖由β-1,3-葡聚糖和β-1,6-葡聚糖組成,兩者比例為85:15。β-葡聚糖以β-1,3-葡聚糖為骨架,β-1,6-葡聚糖為支鍊,β-1,6-葡聚糖的還原端連接到β-1,3-葡聚糖非還原端的末端葡萄糖上,并在氫鍵作用下共同構成一個三維的網絡結構。其網狀結構具有較強彈性,在正常滲透壓下可大量延伸。而當細胞處于高滲透壓情況下時,三維網狀結構可迅速收縮,隻占原來體積的40%左右,當滲透壓恢複正常後,三維網狀結構則可恢複原狀。

甘露聚糖具有細胞識别和控制細胞壁孔徑等多種生理功能。甘露聚糖以共價鍵與蛋白質連在一起,主鍊為單鍊,通過α-1,6-糖苷鍵将多個α-甘露糖連接形成,甘露糖側鍊則以α-1,2-和α-1,3鍵與主鍊連接,部分側鍊則結合有決定酵母細胞抗原相關的功能基團。β-1,6-葡聚糖和甘露聚糖的連接在酵母細胞壁的合成中具有重要作用。

生産工藝

酵母細胞壁産品是酵母細胞經自溶、外源酶水解、機械破碎等處理後,通過離心分離獲得細胞壁,最後經濃縮、幹燥等工藝獲得的産品,成品為淡黃色至黃褐色粉末、無異味。

一般工藝

酵母泥→加水稀釋(洗滌,減少篩分阻力)→過濾除雜→沉降分離(傾出上清液)→脫苦脫臭(加水、加鹽,獲得較高純度的酵母液)→酵母自溶(控制條件:溫度、時間、pH值等)→破壁酵母酶解(控制pH值、溫度、時間、加酶量)→滅菌滅酶(控制溫度、時間)→離心分離(分離酵母細胞壁、酵母提取物)→濃縮→幹燥→酵母細胞壁成品。

影響因素

一是自溶過程。自溶溫度、pH、反應時間、助溶劑組成、添加量等。二是酶解過程。酶制劑選擇、酶解參數(pH值、溫度、時間、加酶量)等。三是噴霧幹燥。幹燥時間、溫度等均會影響成品含水量及顔色。

段勝林等研究發現,适宜自溶條件為:自溶溫度50~60℃,pH5.0~6.0,剪切微化處理約9h以上,選用0.8%濃度NaCl和200mg/LVB2作為酵母自溶促進劑,料液比1:8~10,在此條件下提取率可達70%左右。經綜合分析,酵母細胞壁産品的适宜提取條件:溫度60℃,料液比1:10,蛋白酶添加量0.02~0.03%,NaOH濃度2%。

功能及作用

研究表明,酵母細胞壁能激發動物機體的免疫功能和抗病力,參與和促炎細胞因子TNF-α釋放,參與其他細胞因子如1L-1、1L-2和1L-6釋放。其功能主要依賴于特有的β-葡聚糖和甘露聚糖的功能作用。

β-葡聚糖

酵母細胞壁的β-葡聚糖具有免疫調節功能,這與其獨特的三股螺旋結構有關,螺旋外側有部分親水基團,是非特異性免疫刺激多糖,能與機體的免疫細胞受體特異性結合,刺激B細胞、T細胞、自然殺傷細胞産生大量巨噬細胞,進而調控機體免疫。β-葡聚糖通過巨噬細胞發揮生理功能:一是強化吞噬功能;二是通過巨噬細胞的抗原呈遞作用,促進特異性免疫應答;三是活化的巨噬細胞可分泌多種生物活性物質,如TNF-α、1L-1、NO、活性氧等。其中1L-1和NO是重要的免疫調節因子,具有抗病毒、抗細菌、抗腫瘤等活性,TNF-α具有提高血管上皮細胞通透性、促進免疫效應分子聚集、刺激其他炎性細胞因子釋放等作用。

徐軍發等研究指出,酵母多糖是一種免疫調節劑,可誘導小鼠腹腔巨噬細胞産生1L-1和NO。Suzuki等研究表明,β-1,3-葡聚糖和β-1,6-葡聚糖可通過激活巨噬細胞,刺激T細胞向輔助性Thl細胞亞群分化,進而提高宿主抗腫瘤和抗病原微生物的功能。孔維華等研究指出,β-葡聚糖是一種重要的消化道黏膜免疫增強劑。衆所周知,巨噬細胞是重要的組織修複指導細胞,嗜中性粒細胞是重要的抗感染細胞,而這兩大類細胞包面均含有β-1,3-葡聚糖受體,是β-葡聚糖的效應細胞。β-葡聚糖通過活化胃腸道組織中的巨噬細胞(組織修複)和嗜中性粒細胞(抗感染),活化“免疫-神經-内分泌”調節網絡,增強細胞抗應激、抗感染能力,增強巨噬細胞的組織修複作用,加速潰瘍修複。HissS等研究指出,β-1,3-葡聚糖還可作為免疫佐劑,刺激抗體産生。研究結果表明β-葡聚糖(酵母細胞壁提取)對斷奶仔豬具有明顯的免疫功能,可顯著提高仔豬體内藍耳病抗體滴度。FiguerasA等研究,應用酵母β-葡聚糖作為疫苗免疫佐劑的使用效果,試驗表明葡聚糖作為免疫佐劑使用時,疫苗與佐劑使用的先後順序不同會對免疫效果産生影響;以接種疫苗後再注射葡聚糖,效果較好。

β-葡聚糖的抗氧化功能表明,酵母β-葡聚糖可以抑制由OH引起的磷脂酰膽堿脂質體過氧化反應,顯著降低共轭二烯鍵生成。羧甲基化的β-1,3-葡聚糖還具有清除自由基的功能,具有明顯的抗氧化活性。據對患關節炎的小鼠注射羧甲基葡聚糖後,其血漿中羧基含量測定,說明小鼠組織氧化程度緩解,這為羧甲基葡聚糖應用于關節炎疾病的治療提供了新思路。

β-葡聚糖的其他生物學功能。有綜述顯示,在動物消化道中β-1,3-葡聚糖具有不吸收、不可溶、不産生粘性,能清理腸道、清除遊離基、溶解膽固醇、預防高脂血症等功能,還可抵抗濾過性細菌、真菌、病毒等引起的感染。此外,β-1,3-葡聚糖是一種低熱量的食品添加劑,能明顯降低血液中葡萄糖含量,控制肥胖,預防糖尿病和心血管疾病。

甘露聚糖

酵母細胞壁産品中的甘露聚糖,現已确認的兩個功能是吸附病原菌和調節免疫。腸道病原菌感染的關鍵是能成功粘附到腸粘膜,粘附的機理是病原菌的鞭毛或絨毛上的外源凝集素能特異性識别宿主上皮細胞膜的受體并與之結合。甘露聚糖主要通過以下兩方面發揮抗菌功能:一是幹擾腸道病原體的定植。原理是病原菌在腸壁上的特異受體與甘露聚糖的結構特别相似,腸道内如有豐富的甘露糖源,就可與病原菌的特異受體結合,阻止病原菌附着于腸壁上,從而有效抑制感染。病原菌與甘露聚糖結合後,也不能利用甘露聚糖作為其生長的能量來源,所以甘露聚糖具有防止病原菌定植和繁殖的雙重作用,故又稱其為“病原菌吸附劑”或“病原菌清除劑”。二是甘露聚糖可作為腸道内有益菌(如雙歧杆菌、乳酸杆菌等)的營養物質,可促進有益菌大量繁殖,進一步抑制有害菌生長。據Alitech報道,甘露聚糖可被雙歧杆菌和乳酸杆菌等有益菌選擇性發酵利用,促進其生長繁殖,産生乙酸和乳酸,導緻腸道pH降低,進一步抑制産氣莢膜梭菌等有害菌的生長繁殖,從而起到抑菌作用。閻桂玲等研究表明,啤酒酵母甘露聚糖可促進有益菌生長,提高腸道内揮發性脂肪酸含量。

甘露聚糖的免疫調節功能,主要體現在可增強細胞因子釋放和幹擾素活性,促進或協調不同免疫細胞的活動,增強白細胞等向感染部位遷移,活化巨噬細胞。CheTM等研究發現,在豬繁殖與呼吸綜合征病毒感染的斷奶仔豬日糧中添加甘露聚糖,能顯著降低仔豬血清中的TNF-α含量,增加IL-1含量和淋巴細胞數量,從而保障豬體健康;EicherSO等研究表明,甘露聚糖能通過緩解斷奶仔豬細菌感染,調節先天性免疫,促進仔豬生長。

甘露聚糖還能激活免疫應答,與疫苗一起使用時,能與某些病毒、毒素、真核細胞結合,結合後的甘露聚糖作為外源性抗原助劑,能緩解抗原吸收,提高抗原效價,所以甘露聚糖作為助劑可以提高機體的細胞體液免疫。另外,甘露聚糖還可通過氫鍵和範德華力等分子間作用力穩固吸附多種黴菌毒素,形成多糖-毒素複合物,阻止毒素被腸道吸收,其特殊的空間結構也為毒素的結合提供了更多位點。SwamyH等研究表明,甘露聚糖能緩解黃曲黴毒素對肉雞日增重和采食量産生的的不利影響,降低器官腫脹危害。

能量效應

葡聚糖、甘露聚糖在大腸中可被雙歧杆菌等腸内細菌發酵利用,産生短鍊脂肪酸。短鍊脂肪酸一部分被大腸黏膜上皮細胞利用轉化成能量,另一部分被轉移到肝髒利用。上述機能也可增加有機酸含量,減少腐敗物質産生,降低氨和硫化氫的排放。

相關詞條

相關搜索

其它詞條