簡介
薄層色譜又叫薄闆層析，是色譜法中的一種，是快速分離和定性分析少量物質的一種很重要的實驗技術，屬固—液吸附色譜，它兼備了柱色譜和紙色譜的優點，一方面适用于少量樣品（幾到幾微克，甚至0.01微克）的分離；另一方面在制作薄層闆時，把吸附層加厚加大，因此，又可用來精制樣品，此法特别适用于揮發性較小或較高溫度易發生變化而不能用氣相色譜分析的質。此外，薄層色譜法還可用來跟蹤有機反應及進行柱色譜之前的一種“預試”。
薄層色譜(Thin Layer Chromatography)常用TLC表示，又稱薄層層析，屬于固－液吸附色譜。是近年來發展起來的一種微量、快速而簡單的色譜法，它兼備了柱色譜和紙色譜的優點。一方面适用于小量樣品（幾到幾十微克，甚至0.01μg）的分離；另一方面若在制作薄層闆時，把吸附層加厚，将樣品點成一條線，則可分離多達500mg的樣品。因此又可用來精制樣品。故此法特别适用于揮發性較小或在較高溫度易發生變化而不能用氣相色譜分析的物資。此外，在進行化學反應時，常利用薄層色譜觀察原料斑點的逐步消失來判斷反應是否完成。
薄層色譜是在被洗滌幹淨的玻闆（10×3cm左右）上均勻的塗一層吸附劑或支持劑，帶幹燥、活化後将樣品溶液用管口平整的毛細管滴加于離薄層闆一端約1cm處的起點線上，涼幹或吹幹後置薄層闆于盛有展開劑的展開槽内，浸入深度為0.5cm。待展開劑前沿離頂端約1cm附近時，将色譜闆取出，幹燥後噴以顯色劑，或在紫外燈下顯色。
儀器材料
(1)玻闆除另有規定外，用5cm×20cm，10cm×20cm或20cm×20cm的規格，要求光
滑、平整，洗淨後不附水珠，晾幹。
(2)固定相或載體最常用的有矽膠G、矽膠GF、矽膠H、矽膠HF，
其次有矽藻土、矽藻土G、氧化鋁、氧化鋁G、微晶纖維素、微晶纖維素等。
其顆粒大小，一般要求直徑為10～40μm。薄層塗布，一般可分無黏合劑和含黏合劑兩種；
前者系将固定相直接塗布于玻闆上，後者系在固定相中加入一定量的黏合劑，一般常用
10%～15%煅石膏(CaSO4.2H2O在140℃加熱4小時)，混勻後加水适量使用，或用羧甲基
纖維素鈉水溶液(0.5%～0.7%)适量調成糊狀，均勻塗布于玻闆上。也有含一定固定相
或緩沖液的薄層。
(3)塗布器應能使固定相或載體在玻闆上塗成一層符合厚度要求的均勻薄層。
(4)點樣器同紙色譜法項下。
(5)展開室應使用适合薄層闆大小的玻璃制薄層色譜展開缸，并有嚴密的蓋子，
除另有規定外，底部應平整光滑，應便于觀察。
操作方法
(1)薄層闆制備除另有規定外，将1份固定相和3份水在研缽中向一方向研磨混合，
去除表面的氣泡後，倒入塗布器中，在玻闆上平穩地移動塗布器進行塗布（厚度為0.2～
0.3mm），取下塗好薄層的玻闆，置水平台上于室溫下晾幹，後在110℃烘30分鐘，即置
有幹燥劑的幹燥箱中備用。使用前檢查其均勻度（可通過透射光和反射光檢視）。
(2)點樣除另有規定外，用點樣器點樣于薄層闆上，一般為圓點，點樣基線距底
邊2.0cm，樣點直徑及點間距離同紙色譜法，點間距離可視斑點擴散情況以不影響檢出為
宜。點樣時必須注意勿損傷薄層表面。
(3)展開缸如需預先用展開劑飽和，可在缸中加入足夠量的展開劑，并在壁
上貼二條與缸一樣高、寬的濾紙條，一端浸入展開劑中，密封缸頂的蓋，使系統平衡或
按正文規定操作。
将點好樣品的薄層闆放入展開缸的展開劑中，浸入展開劑的深度為距薄層闆底邊0.5
～1.0cm（切勿将樣點浸入展開劑中），密封缸蓋，待展開至規定距離(一般為10～15cm)，
取出薄層闆，晾幹，按各品種項下的規定檢測。
(4)如需用薄層掃描儀對色譜斑點作掃描檢出，或直接在薄層上對色譜斑點作掃描
定量，則可用薄層掃描法。
薄層掃描的方法，除另有規定外，可根據各種薄層掃描儀的結構特點及使用說明，
結合具體情況，選擇吸收法或熒光法，用雙波長或單波長掃描。由于影響薄層掃描結果
的因素很多，故應在保證供試品的斑點在一定濃度範圍内呈線性的情況下，将供試品與
對照品在同一塊薄層上展開後掃描，進行比較并計算定量，以減少誤差。各種供試品，
隻有得到分離度和重現性好的薄層色譜，才能獲得滿意的結果。
掃描儀
用表面塗有吸附劑的石英棒（直徑0、9mm；長200mm）代替薄層闆，點樣于棒一端，按一般方法展開，以氫焰檢測器為檢測單元，棒放于儀器内，點火，以一定速度掃描。
後測定法
薄層經展開後用刮刀或捕集器将斑點的吸附劑捕集後，再用适當有機溶劑洗脫，然後用可見、紫外分光光度法、熒光分光光度法測定含量。
但樣品斑點不能噴顯色劑，以免影響測定，斑點位置的确定方法。
樣品在紫外線下發射熒光的，可在紫外燈下觀察斑點并用針劃去斑點位置。
用碘蒸汽顯色，在組分處理出棕色斑點（碘吸附後會揮發）。
用标準物對照，将标準點于邊上一測顯色時，蓋住樣品，定出斑點位置。
一種薄層色譜儀
一種薄層色譜儀，包括底盤、連接柱、支柱、底座、支撐闆、頂闆、薄層色譜儀本體、第一抽拉把手、收納盒、盛放闆、隔闆、酒精瓶、清潔布、清潔桶、卡闆、清潔刷、清潔球、清潔手套、盛放架、第二抽拉把手、頂槽箱、推拉闆、第一槽位、固定塊、滾輪、第二槽位和槽位闆。所加裝的頂闆内部開有槽位，主要是為了方便薄層色譜儀本體在進行檢測的時候，方便檢測工具的放置，同時加裝的推拉杆，主要可以推動頂闆，便于使用者拿取和放置，同時結構簡單，不占用過多空間；所加裝的收納盒，裡面放置的清潔用具，方便使用者檢測完成後清理薄層色譜儀的表面的灰塵和一些檢測遺留下來的化學殘留品，保證了薄層色譜儀的潔淨型。
