研究應用
優點
1、直接觀察活細胞的形态結構和生命活動。用于細胞學、遺傳學、免疫學、實驗醫學和腫瘤學等多種學科研究、
2、直接觀察細胞的變化可便于攝影。
3、研究細胞種類如低等到高等到人類、胚胎到成體、正常組織到腫瘤。
4、便于使用各種技術：相差、熒光、電鏡、組化、同位素标記等方法觀察和研究細胞狀況。
5、是分子生物學和基因工程學的研究對象，也是其主要的組成部分。
6、易于施用物理、化學生物的實驗研究。
7、易于提供大量生物性狀相似的實驗對象，耗資少比較經濟。
8、成為生物制品單克隆抗體生産和基因工程等的材料來源。
缺點
組織和細胞離體後獨立生存在人工的培養環境中，雖然模拟體内環境，仍有很大差異。因而利用培養細胞做實驗時，不應視為體内細胞完全相同，把實驗結果推測體内，輕易做出與體内等同的結論。
細胞類型
細胞類型根據是否附于支持物上生長的特性，分為貼附型、懸浮型。
貼附型
細胞貼附在支持物表面生長，隻依賴貼附才能生長的細胞叫做貼附型細胞(Anchorrage-dependentcells)這種現象與細胞分化有關。
貼附型細胞的分型
1、成纖維型細胞：(fibroblast)來自中胚層
特點：與體内成纖維細胞形态相似，胞體梭型或不規則三角形，中央有圓形核，胞質向外伸出2～3個長短不同的突起。細胞在生長時呈放射狀，漩渦或火焰狀走行。
起源：細胞來自中胚層間充質組織。
除真正的成纖維細胞、心肌、平滑肌、成骨細胞、血管内皮細胞。
注意：細胞在培養時成為成纖維型細胞是一種慣稱，與體内細胞不同。
(epithliumcelltype)來自外胚層。
特點：扁平不規則多角型、圓形核、細胞緊密相連成細胞增殖數目增多時，整個上皮膜随之移動。邊緣細胞很少脫離細胞群而單獨活動“拉網”現象與起源内外胚層組織有關。
組織:皮膚表皮及其衍生物(汗腺、皮脂腺)消化道分上皮、肝、胰、肺泡上皮。
3、遊走型細胞(wanderingcelltype)
特點：在支持物上散在生長，不連接成片，胞質伸出僞足或突起呈活躍的遊走或變形運動，速度快不規則，密度大連接成片呈多角形不易與其他類型的細胞區别。
4、多形型細胞(polymorphiccelltype)
特點：無規律的形态，如神經細胞。
懸浮型
特點：不貼附在支持物生長，胞體圓形，在培養液中生長空間大，可長時間的生長，繁殖旺盛便于做細胞代謝研究。S180肉瘤、血液裡的白細胞、K562、HL－60。
分型的目的：
方便描述細胞在培養過程中的形态變化。培養條件好時，細胞相對穩定，可反映出起源、正常異常的區别，作為判定細胞生物學性狀指标。
強調：一般形态并不是一項可靠指标要受各方面影響。
如：反複開關溫箱、溫度、C02的濃度、培養基變堿、支原體、pH值。細胞在接種時呈三角型狀态，經培養一定時間後，細胞在傳代前已形成上皮型細胞。
增殖
培養細胞的生存環境是培養瓶、器皿或其他容器，生存空間及營養是有限的。當細胞增殖到一定密度後，分離出一部分細胞和更新營養液，使細胞更好地生存，這一過程稱之為“傳代”(passage或subculture)。
值得注意的是：每次傳代細胞在生長和增殖方面受到一定的影響。
細胞生命期
指細胞在培養過程中持續增殖和生長的時間。一般根據細胞種類、性狀和原供體的年齡的情況而定。
如：二倍體成纖維細胞，在不凍存和反複傳代條件下可傳30～50代，相當于150～300個細胞增殖周期，能維持一年左右的生命，細胞便開始凋亡(apoptosis)。細胞在生存過程中經曆以下三個階段
1、原代培養期(primaryculture)
組織到第一次傳代時間大約為1～4周
特點：
細胞活躍移動，分裂，但不旺盛多呈二倍體核型。
原代與體内原組織形态結構和功能活動基本相似。
各細胞的遺傳性狀互不相關，細胞相互依存性強，如果把這種稀釋分散成單細胞，在軟瓊脂培養基中進行培養細胞克隆的形成率(cloningefficiency)下降，表明細胞獨立生存性差。
2、傳代期
(passage)
初代培養細胞一經傳代便稱之為細胞系(cellline)
特點：
細胞增殖旺盛，并維持二倍體核型，也叫二倍體細胞系(diploidcellline)為了保存二倍體細胞性質，細胞應在初代或傳代早期凍存為好。
一般細胞在10代以内凍存。
凍存配方：
向培養液加入保護劑二甲基亞砜(DMSO)或甘油，封入安瓶中。
存于在液氮中溫度可達到－196℃，可長期儲存。如解凍後細胞複蘇，仍能繼續增殖生長，細胞性狀不受影響，成為保存細胞最主要的手段。
3、衰退期
特點：細胞仍生存增殖減慢不增殖輪廓增強衰退凋亡
注意：細胞在三期中的任何一期（一般發生在傳代後期或衰退期）在某些因素影響下，如血清質量不佳、病毒污染、溫度和pH不穩等，細胞可能發生自發轉化(spontaneoustransformation);
細胞可能獲得永生性(immortality)或稱為惡性性(malignancy)。細胞獲得持久性的增殖能力，這樣的細胞群體稱為連續細胞系(continuouscellline)。而細胞獲得不死性後，細胞核型大多變成異倍體(heteroploid)接觸抑制消失。
培養細胞一代生存期
“一代”指細胞接種到分離再培養的所用的時間。與細胞倍增一代不是一個含義。在細胞一代中，細胞能倍增3～6次，經曆三個階段：
1、潛伏期
(latentphase)：
接種經過懸浮期(細胞質回縮，胞體呈圓球形)貼壁。
初代培養細胞經過10～24小時或更多時間。
連續細胞系和癌細胞系經過10～30分鐘貼附。
貼附現象是一個非常複雜和受多種因素的影響。
影響細胞貼附：底物表面不幹淨，影響細胞貼附。
利于細胞貼附：底物表面帶有陽性物質與特殊物質:
纖粘連蛋白(fibronectinFN)、
細胞表面蛋白(cellsurfaceproteinCSP)
這些物質有的存在與細胞表面，有的來自血清。
潛伏期特點：
長短與細胞接種密度、種類、使用的培養基性質有關。
(1)細胞貼附後進入潛伏期，細胞無增殖。少見分裂相，細胞有運動活動。
(2)初代培養細胞潛伏期約為24～96小時或更長，
連續細胞系和腫瘤細胞潛伏期約6～24小時。
(3)細胞接種密度大潛伏期短。
(4)細胞出現分裂相增多時，标志細胞進入指數增生期。
2．指數增生期
(logarithmicgrowthphase)：
特點：細胞增殖最旺盛階段，分裂相增多。
細胞分裂指數(mitotieindexMI)：
表示每1000個細胞中的分裂相數。
條件：分裂相數與細胞種類、培養成分、pH培養箱溫度有關。
細胞分裂指數：
初代細胞：在0、1%～0、5%之間%，
連續分裂細胞和腫瘤細胞：3～5%。
指數增生期是作為細胞一代活力最好的時期，是進行實驗最好和最主要的階段。
指數增生期持續3～5天，細胞數量增多後生長空間變小，細胞相互接觸可連接成片。
正常細胞：細胞相互接觸能抑制細胞運動，這種現象稱為接觸抑制(contactinhibition)。
腫瘤細胞：沒有這種現象，可作為區别正常與腫瘤細胞的标志之一。當腫瘤細胞達到一定密度後向三維空間發展，使細胞發生堆積(piledup)。
由于細胞不斷增殖分裂，細胞數量持續增多，培養液的營養成分減少，代謝産物增多，細胞受營養的枯竭和代謝物的影響，則發生密度抑制(Densityinhibition)，導緻細胞分裂停止。
3、停滞期
(stagnatephase)
細胞量和密度達到飽和，細胞停滞增殖。表明細胞進入到停滞期，細胞數量持平，也稱為平頂期(plateau）。
特點：細胞不增殖，有代謝活動。培養液中的營養已逐漸耗盡，代謝産物積累增多，pH降低，此時需要傳代，否則細胞将會中毒，發生形态改變，細胞會從底物脫落死亡。
注意：
傳代過晚将影響下一代細胞的生長，至少要再傳1～2代，通過換液淘汰死細胞和受損較輕的細胞。待細胞全部恢複後再用。
在這一點上要特别注意。
