培養基介紹
完全培養基(Complete medium)這是一種在基本培養基内加入一些富含氨基酸、維生素和堿基之類的天然物質,即加入生長因子而制成的各種營養基,可用來滿足微生物的各種營養缺陷型菌株的生長需要,是微生物學上常用的一種培養基。完全培養基根據添加血清量的多少,可分為細胞生長培養基和細胞維持培養基,用于不同細胞和不同研究。
生長培養基
細胞生長培養基(液)是用以維持細胞生長增殖之用,含血清比例較大。生長培養液是培養細胞工作中最主要的培養用液。其組成為:基礎培養基80%~90%,血清(多用小牛血清) 10%~20%,抗生素(多用青黴素100U/mL和鍊黴素100μg/mL)。
這是适用于一般細胞的培養液組成。為培養特定細胞,還要選擇适應性培養基,可能尚需添加基本培養基中缺少或該細胞需要的成分。
維持培養基
這是為維持細胞緩慢生長或不死的培養液,血清含量甚少。一般細胞因缺少生長因子不能增殖,生長緩慢;但發生轉化或癌細胞因自身有産生促生長增殖因子的能力,雖在血清缺少情況下仍能生長;因此維持液可用于選擇發生惡性轉化的細胞。其組成為:基本培養基95%,血清2%~5%,抗生素(多用青黴素100U/mL和鍊黴素100μg/mL)。
此處需注意,如培養正常細胞完全不加血清,可維持細胞不死,但時間過長細胞難免退化。
培養方法
把誘變處理後的細胞接種在含有微量(<0.01%)蛋白胨的基本培養基平闆上,野生型細胞就迅速長成較大的菌落,而營養缺陷型則緩慢生長成小菌落。若需獲得某一特定營養缺陷型,可再在基本培養基中加入微量的相應物質。
在基本培養基中加入抗生素,野生型菌株被殺死,營養缺陷型能在基本培養基中生長而被保留下來。
當需要對細菌進行分離培養時,會用到完全培養基。完全培養基,由于其營養成分較全面,因此被培養的微生物生長較快。